制服を着るうえで最も気になるポイントが、学校側の校則基準と日頃の指導体制です。日大三高は、伝統校ならではの規律ある生活習慣を大切にしており、身だしなみに関する指導は比較的厳格に行われています。
女子のスカート丈に関しては、「膝頭にかかる程度（膝立ちして床につく長さ）」が基本指導ラインです。ウエスト部分を折り返して短くする行為や、ベルト等でたくし上げる着崩しは校則違反となり、登校時の門立ち指導や定期的な頭髪・服装検査（身だしなみチェック）で厳しく是正されます。
男子生徒においても、スラックスの極端な腰穿き（腰パン）や、シャツの第一ボタンを開けネクタイを緩める行為は禁止されています。ソックスの色や指定カバンの所持、カーディガン・セーターの着用方法（ブレザーを着用せずにカーディガンのみで校外を出歩くことの制限など）にも明確なルールが定められています。
一見すると厳格に思えるルールですが、これは町田の広大な自然に囲まれたキャンパスで、生徒全員が学業や部活動に集中できる落ち着いた環境を維持するための教育方針です。乱れのない端正な着こなしが身につくことで、大学進学や社会進出の際にも役立つ「礼儀作法」が自然と養われます。
